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豬丙二醛（MDA）試劑盒使用說明

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍：96T
0.3 nmol/L -8 nmol/L

使用目的：本豬丙二醛MDA試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中丙二醛（MDA）含量。

實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中豬丙二醛（MDA）水平。用純化的豬丙二醛（MDA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入丙二醛（MDA），再與HRP標記的丙二醛（MDA）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的丙二醛（MDA）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中豬丙二醛（MDA）濃度。

豬丙二醛MDA試劑盒組成 
1    30倍濃縮洗滌液    20ml×1瓶    7    終止液    6ml×1瓶
2    酶標試劑    6ml×1瓶    8    標準品（16 nmol/L）    0.5ml×1瓶
3    酶標包被板    12孔×8條    9    標準品稀釋液    1.5ml×1瓶
4    樣品稀釋液    6ml×1瓶    10    說明書    1份
5    顯色劑A液    6ml×1瓶    11    封板膜    2張  
6    顯色劑B液    6ml×1/瓶    12    密封袋    1個

標本要求 
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟
1.標準品的稀釋：本豬丙二醛MDA試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
8 nmol/L    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
4 nmol/L    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
2 nmol/L    3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
1 nmol/L    2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
0.5 nmol/L    1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。