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        產(chǎn)品中心您現(xiàn)在的位置:首頁 > 產(chǎn)品展示 > 生化檢測(cè)試劑盒 > 輔酶Ⅰ系列 > NAD激酶(NADK)測(cè)試盒

        NAD激酶(NADK)測(cè)試盒

        簡(jiǎn)要描述:

        NAD激酶(NADK)測(cè)試盒廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。

        更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:1083

        商品屬性:

        貨號(hào)

        規(guī)格

        檢測(cè)方法

        YSH3230

        100管/48樣

        微量法

        YSH3230-1

        50管/24樣

        可見分光光度法


        商品詳情:
        NAD激酶(NADK)測(cè)試盒測(cè)定意義:

        NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進(jìn)行磷酸化反應(yīng),生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。

        測(cè)定原理:

        NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT),通過在600 nm下測(cè)定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。

        需自備的儀器和用品:

        可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
        試劑組成和配制:

        試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

        試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

        試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。

        試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。

        標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)液,4℃避光保存。


        測(cè)定操作:

        1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到570 nm,蒸餾水調(diào)零。

        2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A空白管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。

        3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取EP管,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。

        4. 測(cè)定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復(fù)顛倒EP管數(shù)次,于570nm測(cè)定吸光值,記為A測(cè)定管。顯色后務(wù)必在30min內(nèi)測(cè)完。

        注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要測(cè)定一次。

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